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下載安裝Flash播放器（四）病原體分離培養(yǎng)。
多用HL-60進行嗜吞噬細胞無形體的分離培養(yǎng)。最常用的分離方法是將白細胞部分接種培養(yǎng)基，然后將100-500μl抗凝血接種到懸浮有2×105或1×106細胞內, 每2-3天染色檢查包涵體，一般5-10天可查見包涵體。由于分離可能受到紅細胞的影響，因此，建議使用以下方法：
1.白細胞分離：采用密度梯度離心方法（Ficoll-Paque）。一般采用2-3 ml EDTA抗凝血，用2倍體積的無菌Hanks 平衡鹽溶液稀釋，最后采用Histopaque（Sigma，St . louis, Mo）密度梯度離心分離白細胞，可以獲得較高的白細胞，用以分離HGA。采用白細胞分離方法進行接種時，應注意防止操作過程中的污染。
2. 紅細胞裂解后收集白細胞（NHCl4裂解法）。
3. 在使用含有紅細胞的標本培養(yǎng)后，另加入宿主未感染的細胞，建立混合培養(yǎng)。
血液白細胞懸浮于2ml體積、含有5-10%胎牛血清的培養(yǎng)基中，且在25 cm2培養(yǎng)瓶內與培養(yǎng)細胞作用3小時。37℃、5% CO2 條件下振搖孵育，可增加病原體與細胞的作用。
病原體的鑒定：可通過種特異引物進行PCR鑒定。
五、生物安全
在標本采集、運輸及實驗室工作過程中，生物安全應參照《病原微生物實驗室生物安全管理條例》中的有關要求進行。
（一）實驗室生物安全。
標本滅活、病原DNA標本提取及病原體分離操作應在生物安全Ⅱ級實驗室進行。非感染性材料的檢測可在生物安全I級實驗室進行。
（二）血液標本采集安全注意事項。
采集病例的標本時，應做好個人防護。采集者應戴乳膠手套，盡量避免病例的血液外溢或直接接觸。如發(fā)生血液外溢污染環(huán)境時，應及時采用75%酒精或常用消毒劑進行消毒處理。應按照對傳染性樣本的要求，對采集標本的器具及病人止血棉球及時進行消毒處理。防止銳器扎傷皮膚，一旦發(fā)生，應按臨床外科要求，及時進行傷口清創(chuàng)。如直接沾染了臨床診斷病例或確診病例的血液，除及時消毒皮膚外，應口服強力霉素預防感染，服用劑量參照《人粒細胞無形體病診療方案（試行）》（附件1）。
（三）采集動物宿主與媒介蜱標本個人防護。
野外采集標本時，應穿著顏色明亮的防護服，并將衣袖或褲管口扎緊以防蜱叮咬人體，且容易發(fā)現蜱的附著。一旦發(fā)現有蜱附著體表，應用鑷子夾取，不要用手直接摘除。野外作業(yè)或活動的人員可使用驅避劑或防蚊油噴涂皮膚，也可用硫化鉀代替防蚊油。
（四）標本運輸安全注意事項。
應參照《病原微生物實驗室生物安全管理條例》中的有關要求（B類）進行。
（五）在診療及標本的采集、包裝和實驗室檢測等過程中所產生的醫(yī)療廢物，應按照《醫(yī)療廢物管理條例》和《醫(yī)療衛(wèi)生機構醫(yī)療廢物管理辦法》等相關規(guī)定處理。