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下載安裝Flash播放器附件4人粒細(xì)胞無形體病專題調(diào)查方案（試行）
為指導(dǎo)發(fā)生疫情的地區(qū)開展人粒細(xì)胞無形體病的調(diào)查，增進(jìn)對(duì)該病病原學(xué)、傳播機(jī)制、危險(xiǎn)因素及臨床診斷等的認(rèn)識(shí)，為制訂相應(yīng)的防控策略和措施提供科學(xué)依據(jù)，特制訂本方案。
一、調(diào)查目的
（一）了解人粒細(xì)胞無形體病疫區(qū)人群感染狀況及抗體水平。
（二）了解人粒細(xì)胞無形體病主要的潛在傳播媒介的種類、分布及帶菌狀況。
（三）了解人粒細(xì)胞無形體病常見的動(dòng)物宿主種類、分布及帶菌狀況。
二、調(diào)查內(nèi)容與方法
（一）血清流行病學(xué)調(diào)查。
1. 調(diào)查對(duì)象
（1）可能暴露者：與患者有類似暴露史的人員（暴露于有可疑野生動(dòng)物或蜱的生境）。
（2）密切接觸者：與患者密切接觸者（參與救治的醫(yī)護(hù)人員、護(hù)理患者的家屬等）。
（3）一般人群：與患者無密切接觸，也無可疑生境暴露者。
2. 標(biāo)本采集
對(duì)所有密切接觸者應(yīng)采集雙份血清，間隔3-4周，另應(yīng)采集可能暴露者及一般人群血清各30-50份。每次采集靜脈血5ml，分離血清送檢。血清標(biāo)本的包裝、貯存及運(yùn)送見《人粒細(xì)胞無形體病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方案（試行）》（附件3）。
3. 標(biāo)本檢測(cè)
采集的標(biāo)本應(yīng)及時(shí)送有條件的省級(jí)疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行抗體檢測(cè)。如當(dāng)?shù)責(zé)o檢測(cè)條件，應(yīng)送中國(guó)疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)方法及注意事項(xiàng)見《人粒細(xì)胞無形體病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方案（試行）》（附件3）。
（二）宿主動(dòng)物調(diào)查。
根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查的線索，確定是否進(jìn)行宿主動(dòng)物的調(diào)查。
1. 調(diào)查地點(diǎn)和時(shí)間
在病例可能感染的地點(diǎn)，或根據(jù)當(dāng)?shù)氐牡乩砭坝^，選擇宿主動(dòng)物調(diào)查的地點(diǎn)。調(diào)查時(shí)間可選擇在疫情發(fā)生后或宿主動(dòng)物活動(dòng)高峰季節(jié)。
2. 捕獲方法
（1）居民區(qū)采用籠夜法。在鼠類經(jīng)常出沒的場(chǎng)所，于傍晚時(shí)在每15m2的房間放置鼠籠一個(gè)，并做好標(biāo)記。誘餌用花生米或油條、油餅等（同一地區(qū)應(yīng)選用同一種誘餌）。次日清晨取回鼠籠，將捕獲鼠的鼠籠放入布鼠袋內(nèi)，系緊袋口，做好記錄，并編號(hào)。
（2）野外采用夾（籠）夜法。在有鼠活動(dòng)的場(chǎng)所，于傍晚時(shí)布放鼠夾（籠），夾（籠）的行距應(yīng)在30m以上，夾（籠）間距為5m，并做好標(biāo)記。誘餌應(yīng)統(tǒng)一。次日清晨取回夾（籠），將捕獲鼠放入布鼠袋內(nèi)，系緊袋口，做好標(biāo)記，并編號(hào)。如捕白天活動(dòng)的鼠，采用夾（籠）日法。
（3）鼠類以外的其它野生宿主動(dòng)物（如野兔等）可通過有關(guān)渠道獲取。
3. 標(biāo)本處理
（1）采集動(dòng)物血標(biāo)本待檢。
（2）解剖前，將所捕宿主動(dòng)物（如鼠等）置于密閉容器內(nèi)，用乙醚深度麻醉。將動(dòng)物（鼠）置于白瓷盤中，先用鑷子夾取盤中和動(dòng)物（鼠）體表的寄生物，如蜱、螨、蚤等，寄生物按鼠只分別置入盛有75％酒精的密閉容器中，并標(biāo)記相應(yīng)鼠只的編號(hào)；然后，采用無菌方法解剖動(dòng)物（鼠），取其脾、肝、腎標(biāo)本，置入相應(yīng)編號(hào)的無菌凍存管內(nèi)，于液氮罐內(nèi)保存。無液氮罐保存條件的，應(yīng)置－20℃環(huán)境保存。
上述標(biāo)本送回實(shí)驗(yàn)室后，應(yīng)盡快檢測(cè)。否則，應(yīng)置－80℃超低溫、或－20℃低溫冰箱內(nèi)保存。
4．動(dòng)物的分類、鑒定
參考《醫(yī)學(xué)動(dòng)物鑒定手冊(cè)》等相關(guān)專業(yè)資料，鑒定宿主動(dòng)物的種類、學(xué)名等。
5. 核酸檢測(cè)及病原分離
（1）采用PCR擴(kuò)增動(dòng)物血液標(biāo)本的DNA，并測(cè)定核苷酸序列。
（2）有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行病原體分離。陽(yáng)性病原分離物送中國(guó)疾病預(yù)防控制中心作進(jìn)一步鑒定。
方法見附件3《人粒細(xì)胞無形體病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方案（試行）》。
6. 計(jì)算動(dòng)物（鼠）種的構(gòu)成、密度及其帶菌率。
（三）蜱的調(diào)查。
1. 調(diào)查地點(diǎn)和時(shí)間
在病例可能感染的地點(diǎn)，或根據(jù)當(dāng)?shù)氐牡乩砭坝^選擇媒介蜱的調(diào)查地點(diǎn)。調(diào)查時(shí)間可選擇在疫情發(fā)生后，或蜱活動(dòng)高峰季節(jié)。
2. 捕獲方法
（1）布旗法。用約1平方米大小的白絨布旗，在調(diào)查地段內(nèi)定時(shí)進(jìn)行拖蜱。拖蜱時(shí)，手持旗桿伸向一側(cè)，使布旗平鋪于草叢上，以等速緩步向前行走，每步行2米觀察一次，將附著于旗上的蜱撿入玻管內(nèi)保存。每小時(shí)檢獲蜱數(shù)即為蜱密度，單位為只／布旗人工小時(shí)，每次捕蜱時(shí)間不少于1小時(shí)（如蜱密度單位采用只／布旗人工分鐘，每次捕蜱時(shí)間一般不少于30分鐘）。同時(shí)，檢查拖蜱者身體上是否附著有蜱，如有，將蜱撿入另一玻管內(nèi)保存，以區(qū)別于布旗法捕獲的蜱。凡拖過蜱的地方，短時(shí)間內(nèi)不應(yīng)在原地重復(fù)調(diào)查。
（2）帶蜱指數(shù)調(diào)查法。用鼠籠在有蜱活動(dòng)的地方捕捉活鼠，鼠體上蜱的采集可參照宿主動(dòng)物體外寄生物采集方法進(jìn)行。平均每只鼠體上的蜱數(shù)即為帶蜱指數(shù)，單位為只／鼠。家養(yǎng)動(dòng)物或其它野生動(dòng)物用適當(dāng)方式制動(dòng)固定后，可直接檢蜱，計(jì)算帶蜱指數(shù)。
3. 蜱的分類、鑒定
參考有關(guān)專業(yè)資料，對(duì)捕獲的蜱進(jìn)行分類、鑒定、命名（學(xué)名）。若當(dāng)?shù)責(zé)o法鑒定，可將采集到的雌、雄蜱各若干只置于75%乙醇溶液中保存，送中國(guó)疾病預(yù)防控制中心傳染病所鑒定。
4. 核酸檢測(cè)及病原分離
（1）采用PCR擴(kuò)增蜱標(biāo)本的DNA，并測(cè)定核苷酸序列。
（2）有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)陽(yáng)性蜱標(biāo)本進(jìn)行病原分離。陽(yáng)性病原分離物送中國(guó)疾病預(yù)防控制中心作進(jìn)一步鑒定。
方法見附件3《人粒細(xì)胞無形體病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方案（試行）》。
5. 計(jì)算蜱種的構(gòu)成、總帶菌率及各種蜱的帶菌率。