DNA的合成、組裝及轉(zhuǎn)移技術(shù)
發(fā)布時(shí)間：2018-11-16 17:16:22 | 來(lái)源：中國(guó)網(wǎng)·中國(guó)發(fā)展門戶網(wǎng) | | 責(zé)任編輯：趙斌宇
關(guān)鍵詞：合成生物學(xué),合成基因組學(xué),DNA合成,基因組拼裝,基因組轉(zhuǎn)移
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圖 1 固相亞磷酰胺法從頭合成寡聚核苷酸鏈的 4 步反應(yīng)
這 4步反應(yīng)包括：（1）去保護(hù)。酸催化去除 DMT（二甲氧基三苯基甲基）基團(tuán)，以便下一輪堿基（dA、 dC、 dG和 dT）添加。（2）堿基偶聯(lián)。將含有 DMT保護(hù)基團(tuán)護(hù)的亞磷酰胺通過(guò)四唑活化劑加到未保護(hù)的 5′?OH末端。（3）加帽。將游離的 5′?OH乙酰化，以防止進(jìn)一步的鏈延伸所造成的單堿基缺失。（4）氧化。通過(guò)碘液將磷酸三酯氧化為磷酸鹽，進(jìn)入一個(gè)反應(yīng)循環(huán)