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下載安裝Flash播放器為指導發生疫情的地區開展人粒細胞無形體病的調查,增進對該病病原學、傳播機制、危險因素及臨床診斷等的認識,為制訂相應的防控策略和措施提供科學依據,特制訂本方案。
一、調查目的
(一)了解人粒細胞無形體病疫區人群感染狀況及抗體水平。
(二)了解人粒細胞無形體病主要的潛在傳播媒介的種類、分布及帶菌狀況。
(三)了解人粒細胞無形體病常見的動物宿主種類、分布及帶菌狀況。
二、調查內容與方法
(一)血清流行病學調查。
1. 調查對象
(1)可能暴露者:與患者有類似暴露史的人員(暴露于有可疑野生動物或蜱的生境)。
(2)密切接觸者:與患者密切接觸者(參與救治的醫護人員、護理患者的家屬等)。
(3)一般人群:與患者無密切接觸,也無可疑生境暴露者。
2. 標本采集
對所有密切接觸者應采集雙份血清,間隔3-4周,另應采集可能暴露者及一般人群血清各30-50份。每次采集靜脈血5ml,分離血清送檢。血清標本的包裝、貯存及運送見《人粒細胞無形體病實驗室檢測方案(試行)》(附件3)。
3. 標本檢測
采集的標本應及時送有條件的省級疾病預防控制中心進行抗體檢測。如當地無檢測條件,應送中國疾病預防控制中心進行檢測。檢測方法及注意事項見《人粒細胞無形體病實驗室檢測方案(試行)》(附件3)。
(二)宿主動物調查。
根據流行病學調查的線索,確定是否進行宿主動物的調查。
1. 調查地點和時間
在病例可能感染的地點,或根據當地的地理景觀,選擇宿主動物調查的地點。調查時間可選擇在疫情發生后或宿主動物活動高峰季節。
2. 捕獲方法
(1)居民區采用籠夜法。在鼠類經常出沒的場所,于傍晚時在每15m2的房間放置鼠籠一個,并做好標記。誘餌用花生米或油條、油餅等(同一地區應選用同一種誘餌)。次日清晨取回鼠籠,將捕獲鼠的鼠籠放入布鼠袋內,系緊袋口,做好記錄,并編號。
(2)野外采用夾(籠)夜法。在有鼠活動的場所,于傍晚時布放鼠夾(籠),夾(籠)的行距應在30m以上,夾(籠)間距為5m,并做好標記。誘餌應統一。次日清晨取回夾(籠),將捕獲鼠放入布鼠袋內,系緊袋口,做好標記,并編號。如捕白天活動的鼠,采用夾(籠)日法。
(3)鼠類以外的其它野生宿主動物(如野兔等)可通過有關渠道獲取。
3. 標本處理
(1)采集動物血標本待檢。
(2)解剖前,將所捕宿主動物(如鼠等)置于密閉容器內,用乙醚深度麻醉。將動物(鼠)置于白瓷盤中,先用鑷子夾取盤中和動物(鼠)體表的寄生物,如蜱、螨、蚤等,寄生物按鼠只分別置入盛有75%酒精的密閉容器中,并標記相應鼠只的編號;然后,采用無菌方法解剖動物(鼠),取其脾、肝、腎標本,置入相應編號的無菌凍存管內,于液氮罐內保存。無液氮罐保存條件的,應置-20℃環境保存。
上述標本送回實驗室后,應盡快檢測。否則,應置-80℃超低溫、或-20℃低溫冰箱內保存。
4.動物的分類、鑒定
參考《醫學動物鑒定手冊》等相關專業資料,鑒定宿主動物的種類、學名等。
5. 核酸檢測及病原分離
(1)采用PCR擴增動物血液標本的DNA,并測定核苷酸序列。
(2)有條件的實驗室應對陽性標本進行病原體分離。陽性病原分離物送中國疾病預防控制中心作進一步鑒定。
方法見附件3《人粒細胞無形體病實驗室檢測方案(試行)》。
6. 計算動物(鼠)種的構成、密度及其帶菌率。
(三)蜱的調查。
1. 調查地點和時間
在病例可能感染的地點,或根據當地的地理景觀選擇媒介蜱的調查地點。調查時間可選擇在疫情發生后,或蜱活動高峰季節。
2. 捕獲方法
(1)布旗法。用約1平方米大小的白絨布旗,在調查地段內定時進行拖蜱。拖蜱時,手持旗桿伸向一側,使布旗平鋪于草叢上,以等速緩步向前行走,每步行2米觀察一次,將附著于旗上的蜱撿入玻管內保存。每小時檢獲蜱數即為蜱密度,單位為只/布旗人工小時,每次捕蜱時間不少于1小時(如蜱密度單位采用只/布旗人工分鐘,每次捕蜱時間一般不少于30分鐘)。同時,檢查拖蜱者身體上是否附著有蜱,如有,將蜱撿入另一玻管內保存,以區別于布旗法捕獲的蜱。凡拖過蜱的地方,短時間內不應在原地重復調查。
(2)帶蜱指數調查法。用鼠籠在有蜱活動的地方捕捉活鼠,鼠體上蜱的采集可參照宿主動物體外寄生物采集方法進行。平均每只鼠體上的蜱數即為帶蜱指數,單位為只/鼠。家養動物或其它野生動物用適當方式制動固定后,可直接檢蜱,計算帶蜱指數。
3. 蜱的分類、鑒定
參考有關專業資料,對捕獲的蜱進行分類、鑒定、命名(學名)。若當地無法鑒定,可將采集到的雌、雄蜱各若干只置于75%乙醇溶液中保存,送中國疾病預防控制中心傳染病所鑒定。
4. 核酸檢測及病原分離
(1)采用PCR擴增蜱標本的DNA,并測定核苷酸序列。
(2)有條件的實驗室應對陽性蜱標本進行病原分離。陽性病原分離物送中國疾病預防控制中心作進一步鑒定。
方法見附件3《人粒細胞無形體病實驗室檢測方案(試行)》。
5. 計算蜱種的構成、總帶菌率及各種蜱的帶菌率。